Etiquette fluorescente

 

Les colorants fluorescents sont des outils importants pour le marquage des biomolécules. Les dérivés de fluorescéine peuvent être largement marqués sur les réactifs utilisés en microscopie à fluorescence, en cytométrie en flux et en détection par immunofluorescence. Généralement, la biotine, le FITC, ces colorants peuvent être arbitrairement marqués sur l'extrémité N ou C des peptides. Mais nous recommandons que le marquage N End ait un taux de réussite plus élevé, une durée plus courte et une opération plus facile. Étant donné que les peptides sont dérivés de la synthèse de l'extrémité C à l'extrémité N, la modification de l'extrémité N sera donc l'étape finale de la synthèse en phase solide -, éliminant ainsi le besoin d'étapes de couplage supplémentaires. Au contraire, s’il s’agit de C, le balisage final nécessite des étapes supplémentaires et le processus est plus complexe.

 

1727320167214663

 

Modification ordinaire de la fluorescence

Modification de la fluorescence Nom chinois N fin N Terminer par l'éditeur de liens
Peptides marqués à la biotine- Biotine- Biotine-Ahx-
isothiocyanate de fluorescéine FITC- FITC-Ahx-
5-carboxyfluorescéine 5-FAM- 5-FAM-Ahx-
dansylfluorescéine Dansyl- Dansyl-Ahx-
5-carboxytétraméthylrhodamine TMR- (TAMRA-) TMR-Ahx- (TAMRA-Ahx-)

 

Pass Lys Modification par fluorescence des liaisons aminés de la chaîne latérale

extrémité N du polypeptide séquence polypeptidique intermédiaire extrémité du polypeptide C
Lys(Biotine)- -Lys(Biotine)- -Lys(Biotine)
Lys(FITC)- -Lys(FITC)- -Lys(FITC)
Lys(5-FAM)- -Lys(5-FAM)- -Lys(5-FAM)
Lys(Dansyl)- -Lys(Dansyl)- -Lys(Dansyl)
Lys(TMR)- -Lys(TMR)- -Lys(TMR)
Lys(Dnp)- -Lys(Dnp)- -Lys(Dnp)

 

La longueur d'onde de la lumière d'excitation et la longueur d'onde de la lumière d'émission des matériaux fluorescents que notre société produit souvent

Fluorophore Ex(nm) Em(nm) Fluorophore Ex(nm) Em(nm)
Hydroxycoumarine 325 386 R-phycoérythrine (PE) (489) 565 578
Chlorure de dansyle 340 578 Rouge rhodamine-X 560 580
AMC 345 445 Tamara 565 580
Méthoxycoumarine 360 410 Alexa fluor 555 556 573
Série Alexa fluor 345 442 Alexa fluor 546 556 573
Aminocoumarine 350 445 Rox 575 602
Dabcyl 453 - Alexa fluor 568 578 603
Cy2 490 510 Rouge Texas 589 615
FAM 495 517 Alexa fluor 594 590 617
Alexa fluor 488 494 517 Alexa fluor 621 639
FITC 495 519 Alexa fluor 633 650 668
Alexa fluor 430 430 545 Cy5 (625) 650 670
5-FAM 492 518 Alexa fluor 660 663 690
Alexa fluor 532 530 555 Cy5.5 675 694
HEXAMEN 535 556 VraiRouge 490; 675 695
5-TAMRA 542 568 Alexa fluor 680 679 702
Cy3 550 570 Cy7 743 767
TRITC 547 572 Cy3.5 581 596