Raisons pour lesquelles les peptides sont instables

Réaction de désamidation :Dans la réaction de désacylation, les résidus Asn/Gln sont hydrolysés pour former Asp/Glu.
Déroulement d'une réaction de désamidation non-enzymatique. exister Asn-Gly- Les groupes amide dans la structure sont plus faciles à hydrolyser, et les groupes amide situés à la surface de la molécule sont également plus faciles à hydrolyser que les groupes amide à l'intérieur de la molécule.
 

Il existe deux raisons principales pour lesquelles les solutions polypeptidiques oxydées sont facilement oxydées.
Premièrement, il y a une contamination par du peroxyde dans la solution.
La seconde est l’oxydation spontanée des polypeptides.
Parmi tous les résidus d'acides aminés, Met, Cys et His, Trp, Tyr Etc. sont les plus sensibles à l'oxydation. La pression partielle de l'oxygène, la température et la solution tampon ont également un impact sur l'oxydation.

hydrolyse:Les liaisons peptidiques dans les polypeptides sont facilement rompues par hydrolyse. Dépend de l'Asp Les liaisons peptidiques impliquées dans la formation sont plus facilement rompues que les autres liaisons peptidiques, en particulier les liaisons peptidiques Asp-Pro et Asp-Gly.

Formation de liaisons disulfure incorrectes :L'échange entre des liaisons disulfure ou entre des liaisons disulfure et des groupes sulfhydryle peut former des liaisons disulfure incorrectes, entraînant des modifications de la structure tertiaire et une perte d'activité.

Racémiser : éliminer Gly Sauf que tous les résidus d'acides aminés. Les atomes de carbone sont tous chiraux et sont sujets à des réactions de racémisation sous catalyse basique. dans Asp Les résidus sont les plus sensibles aux réactions de racémisation.

-éliminer :-L'élimination fait référence aux résidus d'acides aminés dans l'élimination des groupes sur les atomes de carbone. Cys, Ser, Thr, Phe, Tyr Tous les résidus peuvent passer par -Éliminer la dégradation.
dans un pH alcalin susceptible de se produire -L'élimination, la température et les ions métalliques ont également un impact sur celui-ci.

La dénaturation, l'adsorption, l'agrégation ou la dénaturation par précipitation sont généralement liées à la destruction de la structure tertiaire et de la structure secondaire. À l’état dénaturé, les peptides sont souvent plus sensibles aux réactions chimiques et leur activité est difficile à récupérer. Au cours du processus de dénaturation des polypeptides, des intermédiaires se forment d’abord. Habituellement, la solubilité des intermédiaires est faible et ils sont faciles à agréger et à former des agrégats, qui à leur tour forment des précipitations visibles.
 

1) mutagenèse dirigée sur site : La stabilité des polypeptides peut être améliorée par des moyens de génie génétique pour remplacer les résidus qui provoquent l'instabilité du polypeptide ou pour introduire des résidus qui peuvent augmenter la stabilité du polypeptide.

2) modification chimique :Il existe de nombreuses méthodes de modification chimique des polypeptides, et la plus étudiée est le PEG Grooming. PEG Il s'agit d'un composé polymère soluble dans l'eau-, dégradable dans le corps et non-toxique. PEG Après combinaison avec des polypeptides, il peut améliorer la solubilité du polypeptide, ajuster la biocompatibilité, améliorer la stabilité thermique, résister à la dégradation par les protéases, réduire l'antigénicité et prolonger la demi-vie -dans le corps. Choisir la méthode de modification appropriée et contrôler le degré de modification peut améliorer ou améliorer l'activité biologique du produit d'origine.

3) additif :La stabilité des peptides peut être améliorée en ajoutant des additifs tels que des sucres, des polyols, de la gélatine, des acides aminés et certains sels. Les sucres et les polyols augmentent la stabilité du peptide en forçant davantage de molécules d'eau autour de la protéine à de faibles concentrations. Pendant le processus de lyophilisation-, les substances mentionnées ci-dessus-peuvent également remplacer l'eau et former des liaisons hydrogène avec le polypeptide pour stabiliser la conformation naturelle du polypeptide, et peuvent également augmenter la température de transition vitreuse du produit lyophilisé-. De plus, des tensioactifs tels que SDS, Tween, Pluronic peuvent empêcher l'adsorption, l'agrégation et la précipitation de polypeptides en surface.

4) Lyophilisé-séché :Une série de réactions chimiques qui se produisent dans les polypeptides telles que la désamidation, l'-élimination, l'hydrolyse, etc. nécessitent toutes la participation de l'eau, et l'eau peut également être utilisée comme phase mobile pour d'autres réactifs. De plus, la réduction de la teneur en eau peut augmenter la température de dénaturation du polypeptide. La lyophilisation améliore donc la stabilité des peptides